。
1.2.5 Western印迹法观察蛋白质片段 不同浓度的杨梅素处理后，收集悬浮和贴壁的HepG2细胞，以转速1 000 r/min离心10 min，PBS清晰3次，用细胞裂解液与2℃冰浴裂解超过1 h，再以15 000 r/min离心5 min，收集上清液。通过Bio-Rad法蛋白质定量处理后，以SDS-PAGE凝胶电泳，后将蛋白转印至硝酸纤维素膜上，二抗封闭后以氨基联苯胺显色，扫描并记录。
2 结果
2.1 MTT法细胞死亡率和细胞增殖活力检测结果
杨梅素单体化合物对HepG2细胞有明显的生长抑制作用，通过Bliss法测得杨梅素作用48 h后其IC50值为使线粒体外膜通透性增加，进而激活Caspase-3，使其底物PARP水解，DNA产生片段化最后完成HepG2细胞凋亡过程。为使其得到进一步的证实，笔者认为接下来的研究可通过引入Caspase-3和Caspase-9抑制剂，尝试干预杨梅素影响线粒体途径的调控，并检测其量效关系。
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（收稿日期：2012-09-26 本文编辑：李继翔）
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