乏氧性缺氧实验中,注入生理盐水小鼠死亡原因

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乏氧性缺氧实验中,注入生理盐水的小鼠死亡原因2篇

第一篇: 乏氧性缺氧实验中,注入生理盐水的小鼠死亡原因

小鼠实验性缺氧（讲稿）

教学目的：掌握各型缺氧动物模型的复制方法；
观察缺氧时呼吸系统的改变及血液颜色的变化；
了解环境温度改变对缺氧耐受性的影响；
了解中枢神经系统功能状态改变时机体对低气压所致缺氧耐受性的影响。

重点：不同类型缺氧的模型复制方法及其原理。

难点：小鼠腹腔注射操作以及不同组小鼠肝脏呈现不同颜色的原理。

教学时间：2学时

一、实验原理

缺氧是指组织供养缺少或者不能充分利用氧，导致组织代谢、功能和形态结构异常变化的病理过程。根据缺氧的原因和血氧变化特点，将缺氧分为乏氧性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织性缺氧四大类。

乏氧性缺氧的常见原因有氧分压降低和呼吸系统疾病，其共同特征是PaO2、CO2、SO2均降低，实验中将小白鼠放入装有钠石灰的密闭缺氧瓶内，造成吸入气氧分压降低，而二氧化碳分压不伴随升高，从而引起乏氧性缺氧。

血液性缺氧是由于血红蛋白性质和含量改变所致的缺氧，实验利用一氧化碳和亚硝酸钠中毒的方法,使血红蛋白失去携氧能力，从而引起血液性缺氧，其中亚硝酸钠中毒所形成的高铁血红蛋白，可被还原剂美蓝还原成正常血红蛋白，恢复带氧能力，达到抢救和预防的目的。

机体对缺氧耐受性受多种因素影响,本实验将探讨环境温度改变和CNS功能状态改变对缺氧耐受性的影响,当环境温度升高、中枢神经系统兴奋时,机体代谢率增高，单位时间内耗氧量增加，对缺氧耐受性降低；
反之，机体对缺氧耐受性增强。本实验利用中枢神经系统兴奋剂可拉明和中枢神经系统抑制剂乌拉坦来改变中枢神经系统功能的状态。

在不同类型的缺氧小鼠中，皮肤和肝脏颜色各不相同，这取决于血液中血红蛋白的颜色。在乏氧性缺氧模型中，形成的乏氧血红蛋白为紫绀色；
在CO中毒的模型中，形成的碳氧血红蛋白为樱桃红色；
在亚硝酸钠中毒的模型中，生成的高铁血红蛋白为咖色。

二、实验操作及步骤

1. 不同类型缺氧模型复制

（1）乏氧性缺氧：取1号小鼠及5克钠石灰放入缺氧瓶中，盖紧瓶塞，复制乏氧性缺氧。

（2）一氧化碳中毒性缺氧：取2号小鼠，并与一氧化碳发生装置相连，然后将3ml甲酸与2ml 浓硫酸放于锥形瓶中，塞紧后用酒精灯加热。

（3）亚硝酸钠中毒性缺氧：取3、4号小鼠，观察正常表现后，分别向腹腔注入5%亚硝酸钠0.3ml，其中3号注入亚硝酸钠后，立即腹腔注射1%美蓝溶液0.3ml，4号注入生理盐水0.3ml。

观察指标：动物的一般情况、呼吸频率、鼠尾及口唇颜色。每3分钟重复观察上述指标一次，直至动物死亡为止，记录存活时间。

2. 环境温度改变对缺氧耐受性的影响：

（1）取两个缺氧瓶，各放入钠石灰5克。

（2）取500ml烧杯两个，一个加入碎冰块，将杯内水温调制0~4℃，另一个加入热水，将温度调制40~42℃。

（3）取5、6号两只小白鼠，称重后装入两个缺氧瓶内，盖紧瓶塞，然后将两个缺氧瓶分别放于装有碎冰和热水的烧杯内。

3. 中枢神经系统状态对低气压所致乏氧性缺氧耐受性的影响：

取7、8、9号三只小鼠，分别腹腔注射5%乌拉坦、1.5%可拉明、生理盐水各0.3ml。

4. 肝脏颜色的观察：

将1、2、3、4号小白鼠（未死者处死）按顺序放于蜡盘中，用剪刀剪开腹部并向上翻起腹壁，暴露肝脏，观察肝脏颜色变化。

三、小鼠腹腔注射的操作演示

用左手固定动物，使其头低位、腹部朝上，右手持注射器从左下或右下腹部向头部方向刺入皮下，进针2~3mm，再以45º角刺入腹腔，当感到落顿感时表明针已经进入腹腔，回抽无血、尿液或肠液即可注射。

注意事项：

1. 缺氧瓶内外表面要干净透明，以利观察动物在瓶内的表现。

2. 必须保证缺氧瓶完全密闭，否则会影响实验结果。

3. 给小白鼠腹腔注药时要稍靠右下腹，勿损伤肝脏，也不要将药注入肠腔或膀胱。

4. 取用浓硫酸和甲酸时要用专用吸管，小心取用，加热时不宜过快，缓慢生成CO。

第二篇: 乏氧性缺氧实验中,注入生理盐水的小鼠死亡原因

大部份用生理盐水好,但也有的要用葡萄糖.因为大多抗生素在酸性环境下会分解,导致药物失效甚至是致敏源增多。
一：用糖水还是用盐水要根据病人的具体情况而定.
1:根据病人的原发病及其并发症而定：（1 ）如果病人有高血压,冠心病,及心功能 不好,应减少盐水的摄入,以减轻心脏负担. （2）如果病人有糖尿病但心肾功能尚可,可以用盐水,但用糖时可加胰岛素兑调. （3）.如病人肾功能不好,要减少钠水的摄入,减轻钠水储溜.
2:根据病人的化验结果. （1）如电解质结果.看是否有低钠血症,则给予盐水,反之用糖. （2）根据心肌酶等评测心功能,来决定盐糖的选择.
3:配液 有的药物溶于糖或盐其效能会好点,这要根据药物说明书选则糖盐.
4:如病人休克,应先给于盐水补充血容量再给于糖补能.
5:盐水主要用于电解质的调节 而糖主要作为能量 选用时要首先想到这点.
总之,选择时要慎重,尤其是呼吸科,老年病人多,不同程度存在心功能不好,糖尿病,在选盐时要谨慎,选糖时考虑是否加用胰岛素。

二：溶媒的选择主要还是从抗生素的稳定性方面考虑
1：溶媒的选择主要还是从抗生素的稳定性方面考虑的。在制剂中，葡萄糖在生产过程中需加入盐酸，成品溶液PH多为3左右，而生理盐水稍高，一般为4～5。β—内酰胺类在近中性（PH=6～7）溶液中较为稳定，酸性或碱性溶液均易使β—内酰胺环开环，失去抗菌活性，故应选盐做溶媒。
大环内酯类抗生素在碱性条件下抗菌效能比酸性条件下可增强10多倍（有相关的研究报道），故建议选盐做溶媒，或在溶媒中加入碳酸氢钠提高PH值。
2.溶媒使用的量一般以说明书规定的最低量控制。对于半衰期短的药物，如青霉素，我在儿科临床中就有看到溶于500ml糖溶液，输了2个多小时，前面的药物都代谢了，还没输完，根本达不到有效药物浓度。现在大多是使用100ml+抗生素，或许是治疗习惯，这样效率比较高。
1.为什么抗生素不静推而要静点?第一是因为药物代谢动力学的原因(房室模型,表观分布等有关),二是因为油溶液及水(油)混悬液禁用于静注(抗生素多为水混悬液),因为可引起血管栓塞的危险.这在11版新编药物学上有明确指出.
2.用盐水还是糖水配伍抗生素的问题:其实这是和药物自身理化性质有关了,通常头孢类,青霉素类的抗生素在盐水的PH值中比较稳定,在外界配好后12小时内静滴都可以,但是在葡萄糖这类大分子物质中,抗生素会络合,稳定性下降.
而合成类抗生素如甲硝唑,奎诺酮类等由于其分子结构的特定性,5%的葡萄糖溶液比生理盐水形状更稳定,有关这个问题的详细解释可以请教药学板块的战友.
3.关于溶媒量的问题为什么用100,不用250?其实这个就是习惯问题了,没有绝对要求的,但是对于那些需要限制水输入量的患者(肝硬化腹水,心衰),以及需要迅速把药输完提高血药浓度的,应该用100ml液体配伍.

4：主张使用生理盐水，主要还是从抗生素的稳定性方面考虑的。
以青霉素类为例，它们在近中性（PH=6～7）溶液中较为稳定，酸性或碱性溶液均使之分解加速，应用时最好用注射用水或等渗氯化钠注射液溶解青霉素类。溶于葡萄糖液（PH=3.5～5.5）中可有一定程度的分解。青霉素类在碱性溶液中分解极快。因此，严禁将碱性药液（碳酸氢钠、氨茶碱等）与其配伍。
（参考：陈新谦 金有豫 汤光主编. 新编药物学(第十五版) 人民卫生出版社 P49）原则按药品说明书上明确规定配液要求的配制，一般进口药物说明书比较详细，战友可以搜索一些！
喹诺酮类，如左氧氟沙星，特别是培氟沙星，应该用糖水配。培氟沙星不能见氯离子，否则会形成沉淀。

氨苄西林要用生理盐水不能用葡萄糖。具体问题具体分析
患者为肺性脑病(2型呼吸衰竭)时候,最好用生理盐水带抗生素,因为使用葡萄糖会增加二氧化碳的潴留,加重肺性脑病.但是有的抗生素只能用糖,如多数大环内酯类.
4:如病人休克,应先给于盐水补充血容量再给于糖补能.
我觉得若是休克的话，两者都不能用。因为:休克时胰岛素分泌减少，使用使得用葡萄糖易出现高血糖症，而盐水因所含的钠和氯均比正常细胞间液显著高，休克是肾功能受影响会阻碍钠和氯的排泄而致高氯血症，故不能用。在扩容治疗中，最好用平衡盐溶液也高渗盐溶液。

单从抗生素疗效来说,我们科头孢类的多用盐水,奎诺酮类多用糖,青霉素族都用盐,大环内酯类多用糖.我还是认为说明书比较有权威
喹诺酮类类用糖水，大环内酯类大多用糖，其他的尤其是头孢类和青霉素类用盐水效果比糖水好。但是要兼顾病人是否有糖尿病，电解质是否紊乱，液体入量以及病人的心功能等等诸多问题，不能一概而论，形而上学。

出来临床不久，有些关于抗生素使用的细节问题时不时困扰自己：
1.关于抗生素使用的途径：平时一般都是静脉滴注，但是什么时候考虑用静脉推注？是否所谓重度感染才使用？
2.抗生素的配药：我的上级医师总是说抗生素一般都用盐水配液，如果用5％葡萄糖配制疗效会减低。（当然除了大环内酯类抗生素一般都用糖水配制之外）。不知道他在哪里看到这个结论的，也不知道有没有道理。但是我在何权瀛教授主编的《呼吸疾病诊断治疗指南》的肺炎治疗P66中常用抗生素的药物剂量中只是说“溶剂250ml+药物，静滴”，并没有强调使用盐水配制啊？！
3.与抗生素配制的盐水或者糖水的量的问题：现在我的科室使用抗生素大多是使用100ml+抗生素。有的医生说这样可以提高药物的浓度。乍一看，好像有理，但是那只是在体外时加100ml配的浓度当然比250ml的高，但是进入体内，面对4-5L的血液，似乎又可以忽略不计了。所以在何权瀛教授主编的《呼吸疾病诊断治疗指南》的肺炎治疗中并没有强调100ml，而且是250ml的较多。再说了，感染性疾病一般都伴有发热，需要补充液体，一般都大于1000ml，这样的话好像就更没有必要强调100ml啊。
以上是个人在临床上遇到的一些“小问题”，虽然有自己的看法，但是不知道对错，向各位请教了！
1抗生素的应用，我还没遇到过静脉推注，为什么静脉滴注能够解决的问题，要静推呢？ 一般静推药物多数半衰期短，需要快速发挥药理作用，好像一般的抗生素，半衰期没这么短，如果嫌液体太多，可以给少一些也可，没必要静推（50-100ml）２关于抗生素配制的盐水或者糖水的量的问题：这个问题也困扰我很长时间了，我已曾经问过领导，他也没说出具体的理由，也查过一些资料和药品说明书，没有看到明确的解释（可能检索部全面），个人理解，无论是盐水还是糖水，都是作为液体来稀释或溶解药物，
自己解释原因（可能过于牵强）：
　用盐水配置可能是习惯；

　用盐水配置可能更好的模拟人体生理环境吧，尽管生理盐水并非完全生　　理；

　另外，如果临床上病人需要严格限制Ｎａ的摄入，也只能改用糖水
　临床上，用糖水和用盐水配完的抗生素，在给病人输注完后没有发现有明　显的差别　３用盐水的剂量问题：实际上没有太多限制，现在临床上用药液体量主要根据病人的实际情况，如果病人对盐水有限制，那么液体量就应该少些，如果病人液体量无明显限制，还需要补充液体量，那么就可以多给些；
大家习惯上多选择１００－２５０左右
但静脉推注一定要缓慢“，我在临床上看到别的高年资医生使用静脉推注的时候一般都是都是10-20ml的配液，具体应该推多长时间？我在丁香园下载的一些课件中有关急救药物的使用比如“胺碘酮、西地兰、利多卡因”等药物，一般都是建议10-20min以上。

问了一下病房各位护士推注的速度，她们说一般10~15分钟内推完，有时候推注时，病人会疼痛明显，可能会推上半小时。但是，以这样的速度进行推注，没有发生过不良反应！
有关配液 的问题，也不知道他的来源是否正确，这里给大家贴上看看：
不宜用葡萄糖注射液为溶媒的药物:
呋塞米 析出结晶
布美他尼 析出结晶
苯妥英钠 pH25～30，免疫抑制患者要求AUIC>100）。以及血清药物峰浓度（Cmax）/MIC的比值>8-12。如氨基糖苷类为每日1次,喹诺酮类为每日1-2次为宜。国外将氨基糖苷类药物由每日两次给药改为每日一次全剂量给药，就是根据这一原理设计的。研究表明，如果喹诺酮类的AUIC>100时，细菌即使未被清除，其对药物的敏感率仍维持在90%以上；
倘若AUICMIC达到40%-50%时,抗菌活性都达到了最大化，对细菌的清除不仅时间加快,而且清除数量明显增多。另外，时间依赖型抗菌素，以通常剂量给药，血清药物浓度达到MIC值的4-5倍，其杀菌作用即处于饱和状态，再增加给药剂量一般不能改善疗效。如头孢他啶，分别给以1g和2g, 每日3次，后者的血清药物峰浓度成倍增加,但药效并没有增加,其原因是T>MIC的比例并没有增加。此类抗菌素没有或很少有抗菌素后效应，维持其血清浓度的时间取决于药物的半衰期。如β-内酰胺类抗菌素在感染部位药物浓度超过MIC的持续时间，即T>MIC为50%-60%时杀菌率最高，药效达到最大化,而碳青霉烯类抗菌素,T>MIC为40%就可以达到最佳疗效,之所以存在这种细微的差别,与抗菌素和细菌的青霉素结合蛋白的亲和力的高低差异相关。不同菌种要求给药间隔时间的百分比不同。头孢菌素类抗菌素的最佳疗效为T>MIC 60%-70%,青霉素为50%。目前临床上将青霉素给药剂量提高到每天一次 1000-2000万单位静脉滴注, 以减少给药次数，这种用药方法是错误的。因青霉素的半衰期小于1小时，推荐用药时间为每4-6小时一次。随意延长给药间歇时间，达不到T>MIC和持续时间超过给药间期40%-50%的要求。所以，时间依赖型抗菌素需要每日多次给药，或持续滴注，以维持MIC在间隔时间的50%-60%内。实验证明用青霉素和头孢菌素治疗肺炎球菌感染动物，当血药浓度T>MIC不超过给药间隔的20%时，死亡率为100%，如达到40%-50%或更长时间时，细菌学清除率可达90%-100%，动物均存活。但也应注意，此类抗菌素的药物浓度达到MIC的4倍以上时，即使再增加药物剂量，疗效也不会增加多少。

1、讨论溶媒的量没有太大意义，关键在于单次应用时间。因为30ml的溶媒只要能完全溶解，如果应用微泵泵入，维持几个小时是没有问题的；
100ml的液体放开滴20分钟滴进去也是没有问题的。
不同药物对单次应用的要求是不一样的，比如不久前听了美罗培南的一个演讲比赛，他们的研究结论是单次应用时间相比1小时、2小时而言，3小时效果最好，理由同xueyaoshi战友的PK/PD理论。再比如对于流脑这样的病人，我们科的要求是在第一时间先iv160万单位（成人），然后再ivdrip，具体情况具体分析。
不过千万不要违反说明书，说明书的法律依据的效力是各种依据中最强的，比药典、教课书、专家意见都要强，违反说明书打官司肯定输
理想状态的抗生素给药方案：先给单剂量静注，使血药浓度达峰，再给静点维持稳定血药浓度。但静注抗生素风险太高，容易产生不良反应以及注射部位强烈刺激，所以弊大于利，还是不这样用的好。

我是做临床药学的，从药学的角度说说吧：
1.抗菌药一般不主张静脉推注，可能过快的注入带来过高的血药浓度易发生不良反应。只是在一些一级医院病人经济拮据，为节省费用常见。
2.溶媒的选择主要还是从抗生素的稳定性方面考虑的。在制剂中，葡萄糖在生产过程中需加入盐酸，成品溶液PH多为3左右，而生理盐水稍高，一般为4～5。β—内酰胺类在近中性（PH=6～7）溶液中较为稳定，酸性或碱性溶液均易使β—内酰胺环开环，失去抗菌活性，故应选盐做溶媒。
大环内酯类抗生素在碱性条件下抗菌效能比酸性条件下可增强10多倍（有相关的研究报道），故建议选盐做溶媒，或在溶媒中加入碳酸氢钠提高PH值。
3.溶媒使用的量一般以说明书规定的最低量控制。对于半衰期短的药物，如青霉素，我在儿科临床中就有看到溶于500ml糖溶液，输了2个多小时，前面的药物都代谢了，还没输完，根本达不到有效药物浓度。现在大多是使用100ml+抗生素，或许是治疗习惯，这样效率比较高。
在医院管理年的检查中，对住院病例抗菌药物使用情况检查情况记录表（卫生部），相关的条款就有溶媒的选择是否合理这一条，我们也是按照这些理论去查的。
青霉素是需要滴注时间长的药物。它属于时间依赖性抗菌药物，其抗菌效果由青霉素浓度高于MIC的时间长短决定，因此一开始滴注可以快速达到负荷剂量，随后控制滴注速度，使血药浓度高于MIC的时间越长越好。在国外甚至有采用输液泵长时间维持的方法。类似青霉素的时间依赖性抗菌药物有β-内酰胺类药物、碳青酶烯类药物等。根据PK/PD，此类药物除了延长滴注时间外，还要缩短给药间隔，需用q8h或q6h。

：“大环内酯类抗生素在碱性条件下抗菌效能比酸性条件下可增强10多倍（有相关的研究报道），故建议选盐做溶媒，或在溶媒中加入碳酸氢钠提高PH值。”
抗生素的抗素作用主要发生在被感染生物内，即使用碱性溶媒又能体高机体多少PH值？
我认为使什么样的溶媒重点关心的是抗生素的稳定性，不知我的理解是否正确? 类：时间依赖性杀菌具有弱～中等程度持续效应的抗菌药，为β内酰胺类、红霉素等老一代大环内酯、伊曲康唑等，PK/PD参数是以T＞MIC为参考；

另一类：时间依赖性杀菌具有强持续效应的抗菌药，为阿奇霉素等新一代大环内酯、四环素类、万古霉素、氟康唑等，PK/PD参数是以AUC/MIC为参考。
而再一类就是：浓度依赖性杀菌和具有强持续效应的抗菌药，为氟喹诺酮类、氨基糖苷类、制霉菌素、两性毒素B等，PK/PD参数是以AUC/MIC或Cmax/MIC为参考。

在临床上，抗生素（我指的头孢类）静脉滴注，静脉推注，还有盐水，糖水配置，用100ml，250ml我都用过。
1.关于静脉注射的问题：很多抗生素说明书，在用药途径上，均提到可以肌内注射，静脉注射或静脉滴注，我在临床上碰到的静脉推注（缓慢）的病人，也没有碰到有不良反应的。但静脉推注一定要缓慢，单位时间内血药浓度过高，易产生不良反应。第一次看到静脉注射的时候，也有和shanfeng一样的疑惑，但教授的解释是控制补液量，就像抗生素为什么有的用100ml，有的用250ml稀释一样，比如少尿患者。
2.关于糖水配置的问题：前面战友也都有提及，就是溶媒的PH值对抗生素的稳定性影响较大。抗生素在盐水中比较稳定，不易分解。但是在临床上，碰到一些病人还是用糖水配抗生素，比如一些需要限制液体输入量，但是又需要能量补充的病人，虽然也知道糖水会影响效果，但是为了兼顾，还是这样做了。其实，虽然这些问题心里似有答案，但是正如shanfeng所说，教科书上没有明确的提及，临床上如此用了，但是究竟那个模式最好，是不是应该个体化，不得而知！ 药物间隔时间还要考虑多方面，包括半衰期的，阿奇霉素半衰期约41小时，可以保持体内浓度长时间>MIC,但万古霉素半衰期约3～ 9h，肾功能正常时。