探究影响酶活性的因素实验报告
(一)实验原理(注：市售a-淀粉酶的最适温度约600C)：
1.淀粉遇碘后，形成紫蓝色的复合物。
2.淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖，麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。
(二)方法步骤：
1、取3支试管，编上号(A、B、C)，然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液。
2、另取3支试管，编上号(a、b、c)，然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液。
3、将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组，A和a试管放入热水(约600C)、B和b放
入沸水，C和c放入冰块中，维持各自的温度5min。
思考题1、不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液，这是为什么?
4、分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中，摇匀后，维持各自的温度5min。
5、在3支试管中各滴入1-2滴碘液，摇匀后观察这3支试管中溶液颜色变化并记录。
思考题2、在试管A、B、C中分别能观察到什么现象?
思考题3、通过上述实验，你能得出什么结论?
思考题4、在上述实验中，自变量是什么?无关变量是什么?
思考题5、探究温度对酶活性的影响实验中是否可以用斐林试剂来检验实验结果?
为什么?
思考题1、防止混合时，由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发生变化，反应温度不是操作者所要控制的温度，影响实验结果。
思考题2、试管A、B、C的现象分别是：不变蓝、变蓝、变蓝。
思考题3、温度会影响酶的活性。
思考题4、自变量是不同的温度。无关变量是可溶性淀粉溶液、新鲜淀粉酶溶液、碘液的量。
思考题5、不能。因为如用斐林试剂来检验实验结果，需加热煮沸，会使低温试管中也出现砖红色沉淀，从而影响实验结果、结论。
探究影响酶活性的因素实验报告
一、 实验目的
1、了解pH对酶的活性的影响机理;
2、掌握如何选择酶催化反应的最适pH和获得最适pH条件的确定。
二、 实验原理
酶的生物学特征之一是它对酸碱的敏感性，这表现在酶的活性和稳定性易受环境pH的影响。pH对酶的活性的影响极为显著，通常各种酶只在一定的pH范围内才表现出活性，同一种酶在不同的pH值下所表现的活性不同，其表现活性最高时的pH值称为酶的最适pH。各种酶在特定条件下都有它各自的最适pH。在进行酶学研究时一般都要制作一条pH与酶活性的关系曲线，即保持其他条件恒定，在不同pH条件下测定酶促反应速度，以pH值为横坐标，反应速度为纵坐标作图。由此曲线，不仅可以了解反应速度随pH值变化的情况，而且可以求得酶的最适pH。
三、 实验器材与试剂
1、试剂：磷酸氢二钠、乙酸钠、磷酸二氢钠、柠檬酸、乙酸。
2、器材：可见分光光度计、恒温水浴锅、试管、酸度计
四、 操作步骤
1. 配置缓冲溶液
2. 反应液的配方
准备二组各6支试管，第一组6支试管中，在每支都加入4.5ml上表中相应的缓冲液，然后加入一定量浓度的6.5%蔗糖酶溶液1.0ml(此时的蔗糖酶只能用H2O稀释，酶的稀释倍数和加入量要选择适当，以便在当时的实验条件下能得到0.6-1.0的光吸收值A520。另一组6支试管也是每支都加入4.5ml上表中相应的缓冲液，但不再加酶而加入等量的去离子水，分别作为测定时的空白对照管。所有的试管都用水补足到5.0ml。
3. 终止反应
所有的试管按一定时间间隔加入0.5ml蔗糖(6.5%)开始反应，反应5min后分别加入5.0ml0.1mol/LNaOH溶液，在按测定酶活力的程序操作，测出A520 。
五、 结果与分析
以反应速度(葡萄糖量.min-1)为纵坐标，以pH为横坐标，绘制下蔗糖酶活性与pH的关系曲线。分析曲线并确定蔗糖酶的最适pH或pH范围。
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